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酶联免疫分析仪中的光电比色计的特殊要求

更新时间:2022-09-16   点击次数:516次

  酶联免疫分析仪即酶联免疫检测仪。是酶联免疫吸附试验的仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动两大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶联免疫分析仪中的光电比色计有特殊要求。

  1、将标准品和样品对应的微孔编号,每个标准品和样品做双孔平行,并记录标准品和样品的位置。

  2、在标准品孔中加入50µl各标准品溶液,酶标仪在各样品孔中加入50µl样品溶液。

  3、在所有孔中加入50µl的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光反应30分钟。

  4、小心揭开盖板膜,甩干孔中液体,用稀释好的洗涤液(250μl/孔)充分洗涤微孔板3次,在吸水纸上拍干(拍干后未清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。

  5、酶联免疫分析仪在所有孔中加入100µl的酶标二抗,酶标仪用盖板膜封板,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光反应30分钟。取出酶标板,按步骤4洗板5次。

  6、洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50µl底物液A,再加50µl底物液B,轻微晃动反应板使之混匀,25℃环境避光显色15分钟(在颜色浅的情况下可适当延长反应时间,但总显色时间不要超过30分钟)。

  7、每孔中加入50µl终止液,轻轻晃动使之混匀,在450nm(建议使用双波长450/630nm)下检测吸光度,结果在5分钟内读取。3.jpg